在进行聚丙烯酰胺凝胶电泳以前,PCR产物需要变性吗?
是的,原始的方法是PCR产物与变性缓冲液混合,95或98度变性5到10分钟.
变性缓冲液中含有甲酰胺,是一种变性剂.
后来出现了核酸外切酶,PCR产物酶切成单链再跑,变性不变性效果可能一样的,不过酶有点贵.
一般SSCP,跑单链.
DGGE跑的是双链.
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